在分子生物學、臨床診斷及高通量測序等實驗中,外源性核酸污染是影響實驗結果準確性的重要因素。為有效消除環(huán)境中殘留的DNA或RNA,保障實驗的潔凈度和可重復性,核酸清除劑已成為實驗室常規(guī)使用的清潔工具。本文旨在系統(tǒng)介紹其正確使用方法及關鍵注意事項,幫助科研人員安全、高效地開展相關工作。
一、基本原理
通常含有能夠高效降解DNA和RNA的酶類(如DNase、RNase)或化學成分(如次氯酸鈉、季銨鹽類化合物),通過破壞核酸的磷酸二酯鍵,使其斷裂成小片段,從而失去擴增或檢測活性。部分產(chǎn)品還具備廣譜抗菌、抗病毒功能,適用于多種實驗場景。
二、適用范圍
1.PCR實驗室操作臺面、移液器、離心機等設備表面;
2.樣本處理區(qū)、試劑配制區(qū)及產(chǎn)物分析區(qū)的環(huán)境消毒;
3.實驗服、手套、防護面罩等個人防護用品的去污染處理;
4.超凈工作臺、生物安全柜內部清潔;
5.高通量測序平臺及自動化液體處理系統(tǒng)的維護。
三、使用步驟
1.準備工作:使用前請佩戴手套、口罩及護目鏡,確保通風良好。檢查產(chǎn)品有效期及包裝完整性,避免使用過期或變質試劑。
2.表面預清潔:若待處理表面有明顯污漬或有機殘留物,應先用清水或70%乙醇擦拭干凈,再施用核酸清除劑,以提高去污效率。
3.噴灑或擦拭:將核酸清除劑均勻噴灑于目標區(qū)域,或用無紡布蘸取適量試劑進行擦拭。確保覆蓋所有可能接觸樣本的區(qū)域,包括儀器縫隙、按鈕、門把手等死角。 4.作用時間:多數(shù)需作用5–10分鐘才能充分降解核酸。具體時間請參照產(chǎn)品說明書,切勿提前擦拭或沖洗。
5.后續(xù)處理:作用完成后,可用無菌水或70%乙醇再次擦拭表面,去除殘留試劑,防止對后續(xù)實驗造成干擾。對于精密儀器,建議使用配套的中和劑或專用清潔布。
6.廢棄物處置:使用過的擦拭材料應按生物危害廢棄物規(guī)范處理,不可隨意丟棄。
四、注意事項
1.避免與強還原劑或強酸強堿混用:某些核酸清除劑成分不穩(wěn)定,與不相容化學品混合可能產(chǎn)生有毒氣體或降低去污效果。
2.不可用于人體或活體組織:僅限物體表面使用,嚴禁接觸皮膚、眼睛或黏膜。若不慎接觸,應立即用大量清水沖洗并就醫(yī)。
3.注意材質兼容性:部分含氯或強氧化性清除劑可能腐蝕金屬、橡膠或塑料部件。使用前建議在不顯眼處小范圍測試,確認無損傷后再全面應用。
4.定期更換與輪換使用:長期單一使用某類清除劑可能導致微生物耐受性增強。建議結合物理清潔(如紫外線照射)與其他消毒方式交替使用,提升整體防控效果。
5.儲存條件:多數(shù)需避光、陰涼處保存(通常2–25℃),避免高溫或冷凍。開封后應密封保存,并在規(guī)定期限內用完。
6.驗證清除效果:對于關鍵實驗區(qū)域(如qPCR實驗室),建議定期采用陰性對照或熒光定量法評估核酸清除效果,確保無交叉污染風險。
五、結語
核酸清除劑作為實驗室污染防控體系中的重要一環(huán),其正確使用直接關系到實驗數(shù)據(jù)的可靠性與科研成果的可信度??蒲腥藛T應充分理解產(chǎn)品特性,嚴格遵循操作規(guī)程,同時結合良好的實驗室管理習慣,共同構建潔凈、安全的實驗環(huán)境。唯有如此,方能在日益精密的生命科學研究中行穩(wěn)致遠。